本发明属于多肽，具体涉及一种抗疲劳牡丹肽及其制备方法。

背景技术：

1、牡丹(paeoniasuffruticosaandr.)属于药科(paeoniaceae)药属(paeonia)，为多年生落叶小灌木。牡丹籽含油量丰富，籽油中不饱和脂肪酸总量为80％～92％，其中亚麻酸含量为32％～67％，亚油酸含量为19％～35％。α-亚麻酸作为人体的必需脂肪酸，具有降胆固醇、降血脂等多种保健功能，2011年3月国家卫生部批准凤丹和紫斑牡丹籽油为新资源食品，我国油用牡丹种植面积急剧扩大，牡丹产量逐年提高，油脂提取后产生大量的牡丹籽饼粕。目前这些饼粕主要作为饲料原料或食用菌培养基基料，综合开发利用水平较低。

2、而牡丹籽饼粕中的蛋白含量约为18％～35％，具有很高的营养价值，从牡丹籽粕中提取的蛋白肽具有丰富的氨基酸，不仅易于被人体吸收利用，还能调节机体的生理功能，尤其是具有抗氧化的功能，可以清除运动或劳动后体内的自由基，有效减缓人体疲劳。

3、然而现有技术中牡丹肽的提取工艺复杂，且牡丹肽的组成复杂水溶性差，提取得到的牡丹肽还存在水解度低，蛋白杂质多，抗氧化活性差等问题，极大地限制了其在食品领域的应用，降低了其综合利用度。

技术实现思路

1、为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种抗疲劳牡丹肽及其制备方法。本发明提供的牡丹肽的制备方法，能够有效促进提取过程中牡丹肽的溶出，提高多肽的水解度，并且制得的牡丹肽具有优异的抗氧化性能，能够有效缓解体力疲劳，牡丹肽的分子量分布在1500da以下，分子量小且分布集中，更有利于人体的直接吸收利用，应用于食品、保健品领域具有较广阔的前景。

2、本发明的技术方案是：

3、一种抗疲劳牡丹肽的制备方法，包括如下步骤：

4、s1、将牡丹籽粕进行研磨粉碎，加入去离子水进行微波处理；

5、s2、向步骤s1微波处理后的牡丹籽粕混合液中加入复合助剂，然后进行均质处理；

6、s3、向步骤s2均质处理后的牡丹籽粕混合液中加入中性蛋白酶进行一次酶解；然后调节ph，再加入碱性蛋白酶进行二次酶解，然后灭酶，加入保护剂，搅拌均匀、喷雾干燥，即得。

7、进一步地，所述的牡丹籽粕是以牡丹籽为原料，经过压榨提取油脂后剩余的固体部分。

8、进一步地，所述步骤s2中的复合助剂由大豆卵磷脂、聚乙烯醇和葡甘露聚糖按重量比1～3:7～11:2～4组成。

9、更进一步地，所述步骤s2中的复合助剂由大豆卵磷脂、聚乙烯醇和葡甘露聚糖按重量比2:10:3组成，所述聚乙烯醇为聚乙烯醇1799型。

10、进一步地，所述步骤s1中去离子水的添加量是牡丹籽粕质量的2～3倍。

11、进一步地，所述步骤s2中的复合助剂的添加量为步骤s1中牡丹籽粕重量的1.0～1.8％。

12、进一步地，所述步骤s1中牡丹籽粕研磨粉碎过60～100目筛；所述步骤s1中的微波处理的功率为400～700w，微波处理的时间5～10min。

13、进一步地，所述步骤s2中均质处理的均质压力为20～30mpa，均质时间为5～10min。

14、进一步地，所述步骤s3中的中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量均为所述步骤s2所得的牡丹籽粕混合液重量的2％～3％。

15、进一步地，所述步骤s3中一次酶解时的酶解时间为3～4h，酶解温度为40～50℃；所述步骤s3中二次酶解时调节牡丹籽粕混合液的ph至7～9，酶解时间为2～3h，酶解温度为40～55℃。

16、进一步地，所述步骤s3的灭酶过程为90℃维持20min。

17、进一步地，所述步骤s3中的保护剂由柠檬酸和芦荟苷按重量比3～6:2组成；所述步骤s3中保护剂的添加量为灭酶后的酶解液质量的0.4～0.8％。

18、本发明还提供了一种通过上述制备方法制得的牡丹肽在制备具有抗疲劳作用食品、保健品中的应用。

19、本发明提供的抗疲劳牡丹肽的制备工艺过程中，先向其中加入去离子水进行微波处理，所述的微波功率为400～700w，处理时间为5～10min，在微波处理的过程中，能够利用交频磁场、电场的作用，使牡丹籽粕内的极性分子取向随电场方向的改变而变化，从而导致分子旋转、振动或摆动，加剧反应物分子运动及相互间的碰撞频率，使牡丹籽粕能在短时间内达到活化状态，从而有效促进牡丹肽的溶出，提高牡丹肽的含量。

20、接着向微波处理后的牡丹籽粕混合液中加入由大豆卵磷脂、聚乙烯醇和葡甘露聚糖按特定比例组成的复合助剂，进行均质处理。首先，通过复合助剂的协同作用，能够使牡丹籽粕在溶液体系中分布的更加均匀，为下一步的酶解反应创造更好的反应条件；同时还可以促进牡丹肽的溶出效率，提高牡丹肽的水解度。接着分别采用中性蛋白酶和碱性蛋白酶进行两次酶解，并且对酶解时间、酶解温度、ph等条件进行优化，酶解效果优异，制得的牡丹肽水解度高，分子量分布集中在1500da之内，抗氧化活性更强，更能有利于人体对多肽的吸收。

21、最后向得到的灭酶后的酶解液中加入由柠檬酸和芦荟苷制得的保护剂，有效延长制得的牡丹肽的保质期，并且能够有效提高牡丹肽的抗氧化活性，具有显著的抗疲劳作用。

22、与现有技术相比，本发明提供的抗疲劳牡丹肽具有以下优势：

23、(1)本发明提供的抗疲劳牡丹肽的制备方法，通过优化制备工艺，采用了微波、均质等预处理过程，能够有效促进提取过程中牡丹肽的溶出，从而提高提取效率。

24、(2)本发明提供的抗疲劳牡丹肽的制备方法，通过在微波处理后的牡丹籽粕中添加的复合助剂，能够使牡丹籽粕在溶液体系中分布的更加均匀，从而在酶解过程中使牡丹籽粕和中性蛋白酶和碱性蛋白酶能够充分混合；同时还可以有效促进牡丹肽的溶出效率，提高牡丹肽的水解度。

25、(3)采用本发明提供的制备方法制得的牡丹肽，能够显著提高制得的牡丹肽的抗氧化性能，对dpph自由基清除能力较好，能够有效缓解体力疲劳。且制得的牡丹肽分子量分布在1500da以下，分子量小且分布集中，更有利于人体的直接吸收利用，应用于食品、保健品领域具有较广阔的前景。

技术特征：

1.一种抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中的复合助剂由大豆卵磷脂、聚乙烯醇和葡甘露聚糖按重量比1～3:7～11:2～4组成。

3.如权利要求2所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中的复合助剂由大豆卵磷脂、聚乙烯醇和葡甘露聚糖按重量比2:10:3组成，所述聚乙烯醇为聚乙烯醇1799型。

4.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中去离子水的添加量是牡丹籽粕质量的2～3倍；所述步骤s2中的复合助剂的添加量为s1中牡丹籽粕重量的1.0～1.8％。

5.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中牡丹籽粕研磨粉碎过60～100目筛；所述步骤s1中的微波处理的功率为400～700w，微波处理的时间5～10min。

6.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中均质处理的均质压力为20～30mpa，均质时间为5～10min。

7.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中的中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量均为所述步骤s2所得的牡丹籽粕混合液重量的2％～3％。

8.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中一次酶解时的酶解时间为3～4h，酶解温度为40～50℃；所述步骤s3中二次酶解时调节牡丹籽粕混合液的ph至7～9，酶解时间为2～3h，酶解温度为40～55℃。

9.如权利要求1所述的抗疲劳牡丹肽的制备方法，其特征在于，所述步骤s3中的保护剂由柠檬酸和芦荟苷按重量比3～6:2组成；所述步骤s3中保护剂的添加量为灭酶后的酶解液质量的0.4～0.8％。

10.一种如权利要求1～9任一项所述的制备方法制得的牡丹肽在制备具有抗疲劳作用食品、保健品中的应用。

技术总结

本发明属于多肽制备技术领域，具体涉及一种抗疲劳牡丹肽及其制备方法。本发明提供的抗疲劳牡丹肽的制备方法包括如下步骤：S1、将牡丹籽粕研磨粉碎，微波处理；S2、向牡丹籽粕混合液中加入复合助剂，进行均质处理；S3、向牡丹籽粕混合液中加入中性蛋白酶进行一次酶解；再加入碱性蛋白酶进行二次酶解，加入保护剂，搅拌均匀、喷雾干燥，即得。本发明提供的牡丹肽的制备方法，能够有效促进提取过程中牡丹肽的溶出，提高牡丹肽的水解度，并且制得的牡丹肽具有优异的抗氧化性能，能够有效缓解体力疲劳，应用于食品、保健品领域具有较广阔的前景。

技术研发人员：陆世海,张大虎,于伟东,袁守彦,薛冰,李树瑞,赵贵红,刘建,徐飞

受保护的技术使用者：山东大树达孚特膳食品有限公司

技术研发日：

技术公布日：2024/1/15