福建高海拔地区史氏鲟苗种的繁育技术
周华书
史氏鲟是优质淡水养殖品种,人工养殖的亲鱼作为史氏鲟苗种的繁育,是解决养殖史氏鲟所需鱼种的好方法,同时,福建史氏鲟鱼苗繁殖技术的突破,为福建省的鲟鱼产业的发展,提供了可靠的优质本土史氏鲟鱼苗。现将福建龙鳇鲟业有限公司的史氏鲟鱼苗繁殖技术介绍如下。
1 场地条件
福建龙鳇鲟业有限公司养殖基地所在地,位于周宁县钟山桥水库,该水库属于芹山梯级电站水库的二级水库,海拔 650 m,面积 234 hm 2 ,库容 7.5×10 7 m 3 ,最低死水位 53 m,属于微流水性质的水库,水源来自上游一级芹山水库(库容 2.5×10 8 m 3 、最低死水位 55 m,面积 867 hm 2 ,海拔 740 m),底层水发电注入,使得冬季水温 13~14 ℃,夏季最高水温 26 ℃,库区周边森林植被好、无工业污染源,水质达到 2类水标准,是开展网箱养殖史氏鲟的理想场所;同时周边的山涧水水资源丰富,冬、春季水温为 6~8 ℃,为开展本土史氏鲟鱼苗人工繁殖提供了得天独厚的自然环境。[吉山花瑶自媒体网络首发]
2 催产前期准备
鲟鱼的催产季节一般都在春季进行,为了能提供适合的催产、孵化温度,催产孵化设施建选择在室内进行。开展人工繁殖的设施建设主要包括:亲鱼强化培育池(催产池)、孵化池(育苗池)和培育池等。
2.1 亲鱼强化培育池(催产池)
面积 50~150 m 2 、水深 1 m,材料可以为水泥池瓷砖底,中心排水、无死角,配套水车式增氧机。
2.2 孵化池
一般面积为 4~10 m 2 的圆形池、池边设置 8~10个气石以供增氧,水深 30~40 cm,每口池配套四个长宽高分别为 80 cm×60 cm×25 cm 孵化框,孵化框以木框和沙绢布构成,沙绢网目为 60~80 目,每个孵化框可孵化 2 万粒左右受精卵,即每个孵化池 8万粒左右的受精卵。
2.3 培育池
面积 4~20 m 2 ,水深 20~30 cm,设置可调节水量、角度和流速的进水龙头,池子中间排水,周边气石增氧。材料可以视具体的情况选择用抗老化树脂膜、不锈钢、玻璃钢或水泥瓷砖池等。
2.4 亲鱼的来源
2011 年福建龙鳇鲟业有限公司从外地养殖场迁入 300 余尾 2002—2004 年亲鱼进场养殖,因钟山桥水库优越的环境因素,极其适合鲟鱼养殖各方面的需求,其生长速度快、生物性状符合标准。
3 亲鱼培育的主要技术
3.1 亲鱼的雌雄鉴别
由于鲟鱼亲鱼无法用外部特征来辨别雌雄,因而采用目前推广运用最多的微创手术法进行性别鉴别,有助于减少鲟鱼疾病的发生,降低鱼病传播风险和提高成活率。
3.2 本土亲鱼培育技术
在自然条件下,在黑龙江的鲟鱼的繁殖季节在5—6 月,而在福建龙鳇鲟业有限公司基地全人工养殖环境,由于水库库容大,水温变化不大,缺少天然水域中温度的变化而对亲鱼的刺激。为了满足鲟鱼自然繁殖环境所需水温变化的刺激效果,因地制宜,充分利用养殖基地-周宁县钟山桥水库周边海拔都在 1 000 m 左右的高山峻岭所具独特的自然优势,其山涧水冬、春季从 11 月至来年的 4 月,平均水温 6~8 ℃,且水量丰富,属于高海拔低水温环境的自然条件,符合鲟鱼达到性成熟的要求,可进行亲鱼的培育。
培育时间选择在 10 月末或 11 月初,将挑选出的 10 龄以上的亲鱼(要求不能同一母系,防止近亲繁育影响苗种的质量)进行低温培育,雌鱼体质量要求 25 kg 以上,雄鱼体质量 20 kg 以上,性腺发育达到Ⅲ期末至Ⅳ期以上,培育至来年的 3 月中旬,性腺即可达到Ⅳ期末,此时的水温达到 17~18 ℃即可进行催产。
3.3 亲鱼暂养
在人工催产前,依据催产规模确定成熟度好的亲鱼数量,雌雄比例一般为 2 : 1,把亲鱼放入催产水泥池中暂养。每个池子放亲鱼 2~3 尾,放养亲鱼时把雌雄分开。为了便于记录亲鱼的性别、体质量及成熟发育情况,将亲鱼编号,把号码牌固定在亲鱼背鳍的后部。
4 人工催产
4.1 催产时间掌握及催产药物使用
在来年的春季,水温为 17~20 ℃时开始人工催产。催产剂选用促黄体释放激素类似物(LRH-A2),雌鱼注射 5~8 μg/kg,雄鱼的剂量为雌鱼的 1/2,具体需考虑到其成熟程度及催产时的水温状况。雌、雄亲鱼均采用背部肌肉注射。雌鱼催产药物分 2 次注射,第一针注射全部剂量的 40%,间隔 12 h 后第二针注射剩余的药物剂量。雄鱼的催产药物为 1 次注射,可以在雌鱼注射第一针时同时注射,或安排在雌鱼第二针注射时注射。如果雄鱼注射与雌鱼第一针注射时间相同,则取出的精子要进入低温保存。雄鲟鱼精子成熟后可以多次提取(但需冷藏避光在 1~4 ℃保存,24 h 内对精子活力不构成影响)。
在不同水温条件下亲鱼的效应时间不同,水温16.0~17.5 ℃,效应时间为 20 h。水温 19.0~20.5 ℃,效应时间为 12~14 h。
4.2 成熟精子与卵子的收集方法
雄鱼注射催产剂后,直接起捕取精。采集精液用口径 0.8 cm 软管插入生殖孔,把精液引流倒入盛精子的容器。约 4~6 h 取精 1 次。取精后各取少量用蒸馏水激活后并用显微镜观察精子的活力,保存优质精子备用。雌鱼的催产药物注射后,应随时观察、检查状况。观察暂养池有少量卵或挤压腹部,看生殖器有少量卵流出就可以进入取卵。一般采用手术剖腹采卵,因为雌鱼的输卵管口位于腹部的前部分,挤压较难以挤出取卵,一般采用手术剖腹取卵。具体操作方法是:将卵粒完全游离的雌性史氏鲟亲鱼捕捞出催产池,把史氏鲟亲鱼放于手术台上手术采卵,手术开口位置在靠近亲鱼腹部腹中线约 3 cm(为避免刺破肠道或肠道堵住手术口,所以不选择腹部中线位置,要略靠边),靠近肛门的一端距肛门10 cm 左右,开口长度约为 2~3 cm,然后再用手挤压亲鱼腹部,会有大量成熟卵粒从开口处流出,并反复挤压腹部多次,直至取出大约 70%~80%的卵子为止,余下 20%~30%让亲鱼的自行吸收以恢复鱼体。取卵结束后即可人工授精。同时用缝合线把亲鱼的伤口缝合,并将亲鱼移入水温为 15~17 ℃的池中修复身体。
5 人工授精与孵化
5.1 人工受精
精液用量为每千克鱼卵用 30 mL 精原液(选择2~3 条鲟鱼的精液)。将备用的精液直接倒入盛卵的瓷盆中,立刻导入蒸馏水激活精子(蒸馏水的用量是每千克鱼卵的 10%),戴树胶手套用手搅拌 5 min,再次加入与卵等量的蒸馏水,继续搅拌 20 min,精卵充分结合。把完成受精的鱼卵静置片刻后,弃去污水,漂洗干净,进入下一步脱黏环节。
5.2 受精卵的脱粘
用 20%滑石粉水溶液脱黏 40~50 min,其中需要不停搅拌,直到受精卵吸水膨胀粒粒分离时,即完成脱黏,脱黏后将鱼卵移入孵化器孵化。孵化用水水温控制在 18~20 ℃,溶氧控制在 6 mg/L 以上。孵化器水流量的控制应保证全部鱼卵能正常翻动。当孵化水温在 17 ℃时,历时 105 h 仔鱼出膜。水温18 ℃时,历时 92 h 出膜。水温 20 ℃时,历时 85 h出膜。刚破膜的仔鱼体长 1.1~1.3 cm,如蝌蚪状,做垂直运动,仔鱼孵化出膜后人工用捞海或小碗直接将仔鱼转入培育池进入仔鱼培育或出售环节。
6 体会
人工催产试验使用的亲鱼完全由苗种在人工养殖环境培育而成,由于人工养殖条件优于自然生存环境,能够显著加快生长。无论是体长或体质量,培育的史氏鲟已接近或达到天然水域中史氏鲟亲鱼的生长状况。
研究实验场所对亲鱼的培育具有得天独厚的自然条件,但在不具备此季节性底水温条件的地方进行人工繁殖需要建设冷水处理系统。水库网箱养殖的鲟鱼常年都有卵,其低温刺激目的主要目的就是消耗卵巢多余的脂肪、为春季水温达到可催产的条件做准备。
试验过程中,雄鱼的催产药物为 1 次注射,为便于操作可采用在雌鱼注射第一针时同时注射。但取出的精子要进入低温保存。雄鲟鱼精子成熟后可以多次提取(但需冷藏避光在 1~4 ℃保存,24 h 内对精子活力不构成影响)。
雌鱼采用手术剖腹采卵较为理想,因为雌鱼的输卵管口位于腹部的前部分,挤压较难以挤出取卵,一般采用手术剖腹取卵。鲟鱼的肠道集中于腹部,所以生产中为避免刺破肠道或肠道堵住手术口,所以不选择腹部中线位置,要位于亲鱼腹部腹中线略靠边约 3 cm 处,靠近肛门的一端距肛门 10 cm左右。
雌鱼卵直至取出大约 70%~80%的卵子为止,余下 20%~30%卵让亲鱼自行吸收,作为亲鱼恢复身体所需营养。取卵结束后即可人工授精。同时用缝合线把亲鱼的伤口缝合,并将亲鱼移入水温为 15~17 ℃的池中修复身体。通过实验研究结果,雌鱼腹部手术开口取卵,在开口较小的情况下,对亲鱼伤害并不严重,在为雌亲鱼留下 20%~30%卵让亲鱼自行吸收,作为亲鱼恢复身体所需营养情况下,不打抗生素雌亲鱼身体也能得到较好的恢复,减少了数天连续的抗生素注射,节约劳动成本。