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1、(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010668743.1 (22)申请日 2020.07.13 (71)申请人 江西菌草生物科技有限公司 地址 330000 江西省南昌市青山湖区桂苑 大道创业大厦A座5楼547室 (72)发明人 姚丽华陈帅刘新平常军 (74)专利代理机构 南昌大牛知识产权代理事务 所(普通合伙) 36135 代理人 段维 (51)Int.Cl. A01G 18/00(2018.01) A01G 18/20(2018.01) A01G 18/50(2018.01) (54)发明名称 一种规模。

2、化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方 法 (57)摘要 本发明提供了一种规模化高效高产蚕蛹虫 草生产栽培方法。 该技术方案将蚕蛹消毒方法改 进为臭氧消毒， 接种后采用集中开放式养菌。 具 体来看， 本发明将蚕蛹置于浓度为3040mg/m3 的臭氧环境中， 消毒10min； 接种后， 以盘状容器 集中开放式养菌， 环境温度1517， 空气相对 湿度5060RH， 避光培养， 周期5d。 本发明采 用臭氧消毒， 不存在消毒死角， 可一次性处理大 量蚕蛹， 操作简单； 而且无需配制试剂， 也避免了 化学残留问题和环境污染问题。 同时， 本发明采 用集中管理开放式养菌， 菌丝在生长过程中可获 得充足的氧气， 。

3、并及时散逸呼吸时产生的热量， 可有效缩短僵化时间， 提高僵化率。 与现有工艺 相比， 本发明可减少80的成本投入。 权利要求书1页 说明书4页 CN 111758484 A 2020.10.13 CN 111758484 A 1.一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于包括以下步骤： 1)取活蚕蛹， 置于3040mg/m3的臭氧环境中， 保持10min； 2)取步骤1)处理后的蚕蛹， 在无菌条件下， 向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.20.3mL； 3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中， 在容器上端无覆盖的状态下， 以环境温度 1517， 空气相对湿度5070RH， 避光， 培养5。

4、d； 4)调节培养温度至2022、 空气相对湿度80RH以上， 继续培养， 每日通风， 每日光 照时长1012h； 5)当子实体长度达57cm时， 采收； 6)5560热风干燥。 2.根据权利要求1所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 步 骤1)中所述的活蚕蛹， 不包括死蛹、 病蛹、 虫蛹、 畸形蛹、 软蛹； 所述活蚕蛹现用现剥。 3.根据权利要求1所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 步 骤2)中所述的接种， 是利用连续注射器实施的。 4.根据权利要求1所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 步 骤3)中所述的盘状容器有若。

5、干个， 若干盘状容器纵向叠放， 所述叠放的层数不超过4层。 5.根据权利要求1所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 步 骤2)中所述液体菌种， 是通过以下方法制备的： 在无菌条件下， 将蛹虫草菌种接种至固体斜 面培养基上， 在1822下避光培养710d； 而后， 转接至液体培养基中， 在1820下避 光、 震荡培养57d； 震荡培养的频率为130150转/min。 6.根据权利要求5所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 所 述固体斜面培养基包括以下成分： 200g马铃薯的去皮、 煮汁产物， 葡萄糖1520g， 蛋白胨5 7g， 磷酸二氢钾0.51。

6、g， 硫酸镁0.20.5g， 琼脂粉1820g， 水1000mL。 7.根据权利要求5所述的一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 其特征在于， 所 述液体培养基包括以下成分： 200g马铃薯的去皮、 煮汁产物， 葡萄糖1520g， 蛋白胨57g， 磷酸二氢钾0.51g， 硫酸镁0.20.5g， 水1000mL。 权利要求书 1/1 页 2 CN 111758484 A 2 一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法 技术领域 0001 本发明涉及蛹虫草栽培技术领域， 具体涉及一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽 培方法。 背景技术 0002 蛹虫草， 又名北虫草， 北冬虫夏草。 学名Cordyce。

7、ps militaris(L.)link。 属子囊菌 亚门， 核菌纲， 球壳目， 麦角菌科， 虫草属。 是一种名贵的食药用菌。 现代药学研究表明， 蛹虫 草中含有核苷类、 多糖类、 虫草素、 甾醇类等成分与冬虫夏草相同。 对免疫系统、 神经系统及 心血管系统等疾病具有治疗效果， 并有抗肿瘤和抗癌作用， 应用前景广阔。 目前， 蛹虫草栽 培多采用小麦、 大米等谷物为栽培基质。 虽生产成本较低， 但其产品功用不能与蛹体栽培的 蛹虫草相提并论。 而蚕蛹虫草才具有真正的药用价值。 0003 桑蚕产业作为我国南方地区的特色产业， 其蚕蛹资源十分丰富， 对桑蚕蛹虫草活 体接种高效栽培技术研究的开展有着得天。

8、独厚的地理条件。 目前， 常规栽培方法存在一定 的缺陷。 0004 首先， 常规方法对蛹体的消毒普遍采用化学消毒剂： 例如， 有研究者采用1的高 锰酸钾溶液浸泡5min， 用无菌水淋洗残留的高锰酸钾溶液； 或用75的酒精浸泡5min， 然后 用无菌水冲洗干净； 或用二氯异氰脲酸钠烟雾消毒。 此类方法消毒时间长， 消毒液清洗费工 费时， 容易存在化学残留； 而且， 此类方法处理量较小， 操作也相对繁琐。 另有研究者采用高 温灭菌的方法对蛹体进行消毒， 然而， 高温灭菌会造成蛋白及糖类的变性， 因此会破坏既有 的营养成分。 0005 此外， 目前常规养菌工艺相对繁琐， 用工较多， 生产效率低， 不。

9、利于大面积规模化 栽培； 同时， 常规养菌工艺普遍是在栽培盒中进行封闭式发菌， 对空间的利用不合理， 导致 蚕蛹的僵化时间较长、 僵化率较低。 发明内容 0006 本发明旨在针对现有技术的技术缺陷， 提供一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽 培方法， 以解决常规栽培工艺中， 蛹体消毒方法的效率较低、 操作繁琐、 且容易存在化学残 留的技术问题。 0007 本发明要解决的另一技术问题是， 如何在保证消毒有效性的前提下， 提高处理效 率、 简化操作步骤、 避免化学残留。 0008 本发明要解决的再一技术问题是， 常规养菌方法操作繁琐、 效率低下， 且蚕蛹僵化 时间较长、 僵化率较低。 0009 为实现。

10、以上技术目的， 本发明采用以下技术方案： 0010 一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 包括以下步骤： 0011 1)取活蚕蛹， 置于3040mg/m3的臭氧环境中， 保持10min； 0012 2)取步骤1)处理后的蚕蛹， 在无菌条件下， 向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2 说明书 1/4 页 3 CN 111758484 A 3 0.3mL； 0013 3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中， 在容器上端无覆盖的状态下， 以环境 温度1517， 空气相对湿度5070RH， 避光， 培养5d； 0014 4)调节培养温度至2022、 空气相对湿度80RH以上， 继续培养， 每日通风， 。

11、每 日光照时长1012h； 0015 5)当子实体长度达57cm时， 采收； 0016 6)5560热风干燥。 0017 作为优选， 步骤1)中所述的活蚕蛹， 不包括死蛹、 病蛹、 虫蛹、 畸形蛹、 软蛹； 所述活 蚕蛹现用现剥。 0018 作为优选， 步骤2)中所述的接种， 是利用连续注射器实施的。 0019 作为优选， 步骤3)中所述的盘状容器有若干个， 若干盘状容器纵向叠放， 所述叠放 的层数不超过4层。 0020 作为优选， 步骤2)中所述液体菌种， 是通过以下方法制备的： 在无菌条件下， 将蛹 虫草菌种接种至固体斜面培养基上， 在1822下避光培养710d； 而后， 转接至液体培养 。

12、基中， 在1820下避光、 震荡培养57d； 震荡培养的频率为130150转/min。 0021 作为优选， 所述固体斜面培养基包括以下成分： 200g马铃薯的去皮、 煮汁产物， 葡 萄糖1520g， 蛋白胨57g， 磷酸二氢钾0.51g， 硫酸镁0.20.5g， 琼脂粉1820g， 水 1000mL。 0022 作为优选， 所述液体培养基包括以下成分： 200g马铃薯的去皮、 煮汁产物， 葡萄糖 1520g， 蛋白胨57g， 磷酸二氢钾0.51g， 硫酸镁0.20.5g， 水1000mL。 0023 本发明提供了一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法。 该技术方案包括蚕蛹 消毒、 接种、 养。

13、菌、 出草管理、 采收、 干燥等步骤， 其中， 蚕蛹消毒方法改进为臭氧消毒； 接种 后采用集中开放式养菌。 具体来看， 本发明将蚕蛹置于浓度为3040mg/m3的臭氧环境中， 消毒10min； 接种后， 以盘状容器集中开放式养菌， 环境温度1517， 空气相对湿度50 60RH， 避光培养， 周期5d。 0024 本发明采用臭氧消毒， 臭氧为气体， 流动性好， 包裹性强， 可与蚕蛹充分接触， 不存 在消毒死角， 可一次性处理大量蚕蛹， 操作简单。 与传统的化学消毒法相比， 本发明可操作 性强， 无需配制试剂， 没有化学残留问题和环境污染问题， 方法清洁、 成本低。 与此同时， 本 发明采用集中。

14、管理开放式养菌， 菌丝在生长过程中可获得充足的氧气， 并及时散逸呼吸时 产生的热量， 避免 “烧菌” ， 有效缩短僵化时间， 提高僵化率。 集中管理时空间利用率高， 便于 操作， 减少的了生产环节， 有效降低能源与人工成本消耗。 与现有工艺相比， 本发明可减少 80的成本投入， 具体突出的技术优势。 0025 本发明不仅可以增加蚕蛹的附加值和经济效益， 还可以提高其应用水平， 同时也 解决了蚕蛹 “伤农” 的隐患， 实现经济价值、 社会价值甚至是文化价值的融合提升。 具体实施方式 0026 以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。 为了避免过多不必要的细节， 在 以下实施例中对属于公知的结构。

15、或功能将不进行详细描述。 以下实施例中所使用的近似性 语言可用于定量表述， 表明在不改变基本功能的情况下可允许数量有一定的变动。 除有定 说明书 2/4 页 4 CN 111758484 A 4 义外， 以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相 同含义。 0027 实施例1 0028 一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 包括： 0029 (一)菌种准备： 0030 低温保藏蛹虫草菌种： 常规蛹虫草菌种。 0031 蛹虫草液体菌种： 培养步骤如下： 0032 (1)试管斜面菌种活化 0033 培养基配制： 马铃薯200g(去皮煮汁)、 葡萄糖20g、 蛋白胨。

16、5g、 磷酸二氢钾1g、 硫酸 镁0.5g、 琼脂粉20g、 水1000ml。 分装于试管中， 121高温灭菌20min， 摆放斜面。 然后将保藏 的蛹虫草菌种在无菌条件下接入试管斜面， 18-20， 避光培养7-10d。 0034 (2)三角品液体种子培养： 0035 培养基配制： 马铃薯200g(去皮煮汁)、 葡萄糖20g、 蛋白胨5g、 磷酸二氢钾1g、 硫酸 镁0.5g水1000ml。 将配制好的培养基分装入三角瓶中， 用棉塞或双层聚丙烯薄膜封口。 放入 高压灭菌锅中， 121灭菌20min。 培养基制备完成后， 在无菌条件下接入斜面试管菌种， 培 养温度18-20， 避光震荡培养5-。

17、7d， 震荡频率为130-150转/min。 0036 (二)蚕蛹消毒： 0037 选择新鲜活蚕蛹， 臭氧浓度30-40mg/m3， 处理时间10min。 0038 (三)接种： 0039 在无菌条件下， 使用连续注射器， 每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2-0.3ml。 0040 (四)养菌： 0041 接种后的蚕蛹摆放在养菌盘内， 单组叠码不超过四层。 养菌盘不需覆盖， 直接摆放 在养菌室内培养即可。 环境温度15-17， 空气相对湿度50-70RH， 避光， 培养时间为5d。 0042 (五)出草管理： 0043 培养温度20-22， 空气相对湿度80RH以上， 每日通风， 保持空气新鲜， 。

18、光照时间 10-12h。 0044 (六)采收： 0045 子实体长至5-7cm时采收。 0046 (七)烘干： 0047 55-60热风干燥。 0048 实施例2 0049 一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 包括： 0050 1、 蚕蛹消毒： 蚕蛹应按接种量现用现剥， 以保证蚕蛹的质量， 蛹体大小适中， 鲜活。 凡死蛹、 病蛹、 虫蛹、 畸形蛹、 软蛹应一律给予剔除不得使用。 蚕蛹消毒是， 臭氧浓度30- 40mg/m3， 处理时间10min。 0051 2、 接种： 在无菌条件下， 使用连续注射器， 每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2-0.3ml。 0052 3、 养菌： 接种后的蚕蛹。

19、摆放在养菌盘内， 养菌盘可叠码， 单组叠码不超过四层。 养 菌盘不需覆盖， 直接摆放在养菌室内培养即可。 环境温度15-17， 空气相对湿度50-70 RH， 避光， 培养时间为5d。 说明书 3/4 页 5 CN 111758484 A 5 0053 4、 出草管理： 培养温度20-22， 空气相对湿度80RH以上， 每日通风， 保持空气新 鲜， 光照时间10-12h。 0054 5、 采收： 子实体长至5-7cm时采收。 0055 6、 烘干： 55-60热风干燥。 0056 以上步骤2中接入的蛹虫草菌种为蛹虫草液体菌种， 该菌种通过试管斜面菌种培 养和三角瓶液体菌种培养而成， 具体工艺步。

20、骤为： 0057 试管斜面菌种培养： 0058 配制培养基： 其各组分比例为： 马铃薯200g(去皮煮汁)、 葡萄糖15-20g、 蛋白胨5- 7g、 磷酸二氢钾0.5-1g、 硫酸镁0.2-0.5g、 琼脂粉18-20g、 水1000ml。 斜面培养基制备完成 后， 在无菌条件下接入蛹虫草菌种， 在18-22， 条件下避光培养7-10d。 0059 三角瓶液体菌种培养： 配制培养基： 其各组分比例为： 马铃薯200g(去皮煮汁)、 葡 萄糖15-20g、 蛋白胨5-7g、 磷酸二氢钾0.5-1g、 硫酸镁0.2-0.5g、 水1000ml。 将配制好的培养 基分装入三角瓶中， 用棉塞或双层聚。

21、丙烯薄膜封口。 放入高压灭菌锅中， 121灭菌20min。 培养基制备完成后， 在无菌条件下接入斜面试管菌种， 培养温度18-20， 避光震荡培养5- 7d， 震荡频率为130-150转/min。 0060 实施例3 0061 一种规模化高效高产蚕蛹虫草生产栽培方法， 包括以下步骤： 0062 1)取活蚕蛹， 置于3040mg/m3的臭氧环境中， 保持10min； 0063 2)取步骤1)处理后的蚕蛹， 在无菌条件下， 向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2 0.3mL； 0064 3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中， 在容器上端无覆盖的状态下， 以环境 温度1517， 空气相对湿度5070RH， 避光， 培养5d； 0065 4)调节培养温度至2022、 空气相对湿度80RH以上， 继续培养， 每日通风， 每 日光照时长1012h； 0066 5)当子实体长度达57cm时， 采收； 0067 6)5560热风干燥。 0068 以上对本发明的实施例进行了详细说明， 但所述内容仅为本发明的较佳实施例， 并不用以限制本发明。 凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、 等同替换和改进等， 均应 包含在本发明的保护范围之内。 说明书 4/4 页 6 CN 111758484 A 6 。