接种方法:无菌技术

在实验室,通常用纯菌株进行微生物的研究,即单株菌长成的菌落或只含有一种菌株 的培养物中培养得到增菌液=所以在接种和进行其他操作时,最基本的一点就是要使用 无菌技术以避免菌株的污染

用铂金或镍铬合金丝(直线或前部有环)插人环柄制成接种针(环)用来转接微生物菌 种。环的内部直径是标准的(如4mm),可在标准器上绕成。使用前,将接种环和接种 针在洒精灯外焰垂直快速加热至红色灭菌,然后等待几秒钟让其冷却,以避免过热的接种 环杀死接触到的细菌。也可以使用一次性塑料接种环,它在接种致病菌时很有用,使用结 束后直接放到合适的消毒液中消毒后弃掉。

转接吋,从试管口部取下的棉塞,注意只能拿其外表面的部分,严禁碰到塞的内部,以 防造成污染(也不要放到操作台上)。重新盖住试管前将棉寒在火焰上快速灼烧灭菌。试 管或三角瓶的口部在取下塞子后及重新盖住前都要快速灼烧。一旦取下棉塞,暴露的试 管很容易在空气中被污染,可以将试管倾斜放在酒精灯外焰的附近,用完后尽快盖住瓶塞 以减少污染。用过的接种环,再次接种其他菌株时,要在酒精灯的外焰缓慢加热灭菌。缓 慢加热可以避免接种环上的物质溅出。使用火焰防护罩或接种环安全灭菌装置可以避免 类似危害的发生…

菌株的培养

在菌种鉴定时,应该在菌种的最佳生长温度下培养,只有在使用一些特殊的培养基 (如明胶穿剌培养通常在22℃培养)时例外。若要观察菌体运动和鞭毛的类型,应该在比 最佳生长温度低3〜5℃的条件下培养;在研究食品可能出现的变质时,要根据预测的或 推荐的食品存储温度来决定培养温度。平板要倒置培养,防止冷凝水滴落到生长的菌休 上。培养箱箱门不要长时间敞开。


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