第一章.生殖生理1.1.性成熟在正常的发育过程中,雄鼠出生后23-25天睾丸开始下降,30-35日龄进入阴囊,45-60天产生精子,60日龄以后就可交配。雌鼠一般在70-75日龄阴道开口,同品种品系开口时间不同,有的50日龄即开口,达80日龄即可交配。过早交配,增加雌鼠负担,对子代发育不利。大鼠最适交配日龄为雄鼠90日龄,雌鼠801.2.性周期大鼠的发情不受季节温度的影响,具有多发性、周期性的变化规律。大鼠性周期为4-5在此周期内,生殖系统发生一系列组织学的变化,可作阴道涂片检查。根据阴道上皮细胞的变化,典型的4日性周期分为发情前期、发情期、发情后期和静止期。表二:大鼠性周期发情前期阴道分泌物中大部分是膨大椭圆形扁平上皮细胞。此期约持续17-21小时,当日下午出现排卵前促性腺激素高峰,从傍晚到深夜,此期结束。发情期膨大的上皮细胞核消失,成为鳞状脱落(角化上皮细胞并聚集在一起形成堆状,镜下好象许多落叶堆叠在一起。在情前期过渡到发情时(即深夜)发生排卵,此时大发情行为达高峰,此期约持续9-15小时。发情后期阴道分泌物中大部分是白细胞,混有少量角化上皮细胞,此期约持续10-14小时。静止期阴道分泌物中大部分是白细胞,偶尔可见较小的有核扁平上皮细胞。

此期约持续60-70小时。大鼠排卵通常在发情后8-10小时,发情多在夜间。排卵通常是自发的,但强壮的雄鼠能强迫雌鼠在非发情期接受交配,促进排卵怀孕。黄体的形成及其发育是在发情后期,这时卵子已进入输卵管内。在发情静止期,卵泡又开始发育。1.3.生殖能力雌鼠产仔的多少,取决于品种、胎次、饲养管理的好坏和雌鼠的年龄、体质。一般情况下,适龄雌鼠第1-5胎产仔多,第6胎以后逐渐减少。每胎可产仔8-13只,最多可达产仔20只,如SD大鼠。饲料的营养成分对大鼠的生殖能力也有一定影响。当饲料内缺乏维生素E时,大鼠即丧失生殖能力,特别是雄鼠,可终身丧失,如补喂维生素E,雌鼠可以恢复其生殖能力。温度对大鼠的生殖能力也有影响,当饲养室内持续高温(30以上)可降低雄鼠的交配能力。1.4.交配雌性大鼠只在发情期的数小时内允许雄鼠交配。雌鼠被雄鼠反复追逐之后才接受交配。交配后,雌鼠的阴道口形成一种特殊的膣栓即阴栓。阴栓是雄鼠的精液、雌鼠的阴道分泌物与阴道上皮细胞的混合物遇空气后迅速变硬形成的。阴栓一般在交配后12-24小时左右自动脱落。所以,常把检查阴栓的有无作为判断是否交配的重要标志。1.5.妊娠和分娩大鼠的妊娠期因品种不同略有差异,一般为19-21天。

孕鼠受惊吓往往造成流产或早产。大鼠的分娩昼夜均有发生,但以夜间居多。孕鼠临产前一般表现不安状态,常常不停地整理产窝,随着子宫收缩将仔鼠娩出。分娩结束后约12-24小时母鼠出现产后发情,此时若与雄鼠交配,多能受孕。1.6.哺乳和离乳通常,根据雌鼠体质确定带仔的多少,一般8-10只的,可将其它产窝多余的仔鼠移入窝内代乳,代乳效果很好。母鼠产后1-开始恢复正常,饲料消耗量有逐渐增加的趋势,1-8日内仔鼠体重增长速度慢,平均日增1.8g,每天消耗的饲料量尚不大。8-9日仔鼠长出切齿,14-17日仔鼠睁眼,逐渐采食,仔鼠日增重达2.4g,但这个时期仔鼠仍以母乳为主,所以饲料量略有增加,以上这个阶段称为哺乳第一阶段。从仔鼠生出第一、第二臼齿(19-21饲料的消耗量迅速上升,这是由于仔鼠从全吃乳期过度到半吃乳期,到哺乳末期基本以吃饲料为主。这个时期仔鼠生长发育速度平均日增重3.0g,是哺乳期生长速度最快的阶段,称为哺乳第二阶段。仔鼠的哺乳期一般为21天,留种的仔鼠可延长到23天。过于延长哺乳时间,不仅影响母鼠的健康,还会影响母鼠的发情。哺乳期满的仔鼠要与母鼠分开,雌雄分笼饲养。如果离乳以后雄、雌混养,两周内应清查并分开,超过两周或发现雌鼠盒内混入雄鼠,所在的整盒大鼠即被视为不合格动物全部淘汰。

雄鼠和雌鼠的主要区别是:雄鼠的外生殖器呈圆柱状突起,离肛门较远,乳头不明显;雌鼠外生殖器离肛门较近,生殖器中间有一凹沟,乳头明显。第二章.选种育种留做种用的大鼠需按选种条件严格选择,才能使亲代的优良体质和高产能力以及群体性状逐代积累并遗传下去。繁殖用的种鼠应选择第2-3吃到足够的乳汁,保证其生长发育迅速,体格健壮。哺乳期仔鼠应无死亡。留种的数量要比用量多1/3,以便进一步筛选。选择条件:亲代应选择体质健壮,无疾病,母鼠受孕率高,产仔多(10只以上),母性好,带仔成活率高,同窝仔鼠生长均匀,离乳时幼鼠体格健壮,生活力强;雄鼠配种能力强。留作种用的仔鼠要求健康无病,被毛浓密有光泽,并紧贴身体。眼睛明亮有神,呼吸正常,四肢运动迅速有力,尾巴无脱落,体形匀称,头部宽广,颈部长度适中,背部宽阔平直,腹部系紧。雄性睾丸发育正常,雌性乳头明显。育种:选出的种鼠应雌雄分笼饲养,精心护理,发现异常或病态立即淘汰,必要时全笼淘汰,直到90第三章.配种繁殖根据留种计划和生产用量,按时进行配种。封闭群动物一般采用以下繁殖方法3.1.长期同居交配法一雄一雌终身同居进行交配生产。该方法的优点:雌雄长期同居,雌鼠生产后雄鼠与之交配,在哺乳期雌鼠又能继续怀孕,这样,雌鼠每月可生一胎。

缺点是:雌鼠既哺乳又怀孕,负担太重,如果营养跟不上,雌鼠和仔鼠体质都会下降,直接影响大鼠的质量。3.2.循环交配法一雄多雌同居进行繁殖。可1:2、1:4交配,确认雌鼠怀孕后把它单独放一笼内进行饲养,待其产仔哺乳、仔鼠离乳后把雌鼠放回原笼交配。其优点是:雌鼠受孕后单独饲养,有利仔鼠生长发育,哺乳期不怀孕,母鼠泌乳好,仔鼠健壮。缺点是:近两个月一胎,生产周期长。应用这种方法时注意一个问题,发现雄鼠体质下降要及时更换,以保持较高的怀孕率。第四章.计划生产根据使用计划确定配种日期非常重要,医学实验经常对大鼠体重或日龄要求较为严格,如不按使用计划配种,可能造成延误实验或造成大鼠超重而被迫淘汰。配种计划一般按以下公式进行计算。公式:配种日期=使用日期-(性周期+怀孕期+要求日龄)配种数量=计划总数8(1:1配种)例如:明年2日需要60日龄的大鼠400只,那么,配种日期为使用日期明年2日倒推4+21+60=85天,即是今年11月23配种数量为400只8=50大鼠繁殖和饲养管理3第五章.饲养管理饲养管理是一项非常重要的工作,它直接关系到动物的质量,稍有疏忽则可造成全群覆灭,因此饲养人员必须有高度的责任心和过硬的专业技术。

5.1.工作程序:大鼠饲养管理每周工作安排:周一加水加料,检查仔鼠出生及离乳并登记周二更换垫料,整理卫生、饲养室消毒周三垫料笼具衣物高压灭菌周四同周一工作内容周五同周二工作内容周六工作值班(文字形式回顾本周工作、安排下周工作)周日安全值班5.2.观察和记录观察大鼠的吃料饮水量、活动程度、双目是否有神、尾巴颜色等,记录饲养室温度、湿度、通风状况,记录大鼠生产笼号、胎次、出生仔数等。饲养人员必须 及时填写,决不能后补记录。 5.3. 饲料和饮水 大鼠的饲料应保证其营养需要,并符合各等级动物饲料的卫生质量要求。 长发育的阶段不同,饲料的成分也应有所不同。刚离乳的幼鼠需加喂软料,哺乳期加喂葵花籽。 大鼠具有随时采食的习惯,应保证其充足的饲料和饮水。饲料按照少量多次的 原则添加,软料则应每日更换。一般情况下饲料添加量掌握在每次添加时上次添加 的饲料已基本吃完为宜。饲料在加工、运输、储存过程中应严防污染、发霉、变质 一般的饲料储存时间夏季不超过15天,冬季不超过30 一级大鼠的饮水应符合城市饮水卫生要求,二级大鼠使用PH2.5-2.8的酸化水, SPF 大鼠则用高温高压灭菌水。大鼠饲料与水的消耗比例为1:2,即吃1 克饲料要饮 毫升水。

5.4. 垫料 目前采用的动物垫料主要是木材加工厂的下脚料,如多种阔叶树木的刨花、锯 末、碎木楔等,玉米轴或秸杆粉碎后也是很好的垫料。 每周两次更换垫料是很必要的,因为鼠盒的空间有限, 大鼠的排泄物中含有 的氨气、硫化氢等刺激性气体,对饲养员和动物是不良刺激,极易引发呼吸道疾病 ;排泄物也是微生物繁殖的理想场所,如不及时更换,很容易造成动物污染。每次 更换垫料时必须把盒内的脏垫料全部清除,鼠盒用清水冲刷干净后消毒液浸泡3- 分钟,然后再用清水冲洗干净,晾干备用。最好是有一套备用的鼠盒, 待全部 更换完后集中清洗消毒,这样可提高工作效率。换下的脏垫料及时移出饲养室并做 无害化处理。 5.5. 卫生消毒措施 饲养室的消毒隔离工作是管理中重要的一环,必须引起高度重视, 它是保持 大鼠等级的关键。饲养员进入饲养室前必须更衣,肥皂水洗手并用清水冲洗干净, 戴上消毒过的口罩、帽子、手套后方可进入;饲养室内保持整洁,门窗、墙壁、地 面、鼠盒、架子每天擦洗;每周二、五用0.1%新洁尔灭或其它消毒剂消毒,隔周更 换消毒剂品种,每月进行一次大消毒,用0.1%过氧乙酸喷雾消毒效果较好。 垫料、饲料经高压消毒后放到清洁准备间储存,但储存时间不超过15 盒、饮水瓶每月用0.2%过氧乙酸浸泡3分钟或高压灭菌。

第六章. 实验动物的采血技术方法 动物实验中常常需要采取动物的血液进行检查和分析,所以必须熟练 地掌握动物的采血方法。采血方法依动物的种类和采血的血量不同。静脉 采血,若需反复多次。应先从远心端开始,以免发生栓塞而影响整条静脉。 (一)大、小鼠的采血 1、剪尾采血:需血量少时可用此方法。将动物固定,显露尾部,将 尾尘剪去约5mm,从尾根部向尾端部按摩,血即从断端流出。若用二甲苯 棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45水中数分钟,使尾部血管充盈,可 采到较多的血,但注意二甲苯可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾 静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。如将动物麻醉取血量可更 多些。小鼠每次采血约0.1ml,大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量 从鼠尾末端开始。 2、摘眼球采血:此法常用于鼠类大量采血。用左手固定动物,压迫 眼球,尽量使眼球突出,右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球,立


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