爪哇根结线虫是一种专性寄生虫,能侵染多种植物并给这些植物带来重大损害。它与植物宿主之间建立起一种亲密的寄生关系,诱导植物根细胞重新分化为取食细胞,这些细胞的形成对线虫的发育是必要的。取食细胞不断变大,通过细胞核不断分裂而细胞质不分裂,最终发育为巨大细胞。完整的巨大细胞包含100多个细胞核。通过巨大细胞,根结线虫吸取了大量的营养物质和水分。巨大细胞的形成原理是理解根结线虫与植物寄生关系的关健。本论文采用石蜡切片的方法研究了爪哇根结线虫的发育学。在平均温度约25度的条件下,从卵壳孵化出的L2期幼虫,13小时后开始侵入根尖、两天后诱导巨大细胞开始发育、4天后L2开始定居、8天后巨大细胞完全形成、13天后形成三期幼虫、17天后形成四期幼虫、21天后成虫开始产卵,25天后产卵几乎达到高峰、32天后产卵完毕,线虫完成生活史。运用免疫组织化学研究爪哇根结线虫的致病机理。以成虫的总蛋白免疫昆明小鼠获得抗体,以此为一抗,利用免疫组织化学研究了根结线虫的各个发育阶段。结合根结线虫不同发育时期的蛋白质组分分析结果,最后表明:根结线虫分泌了大量物质成分到根组织内部,诱导根细胞重新分化为巨大细胞。运用免疫印迹和免疫荧光定位两种方法检测了食道腺基因在线虫发育中的表达情况。分别提取根结线虫成虫和幼虫的RNA,进行反转录获得cDNA,以此为模板,扩增了五个食道腺基因和一个热休克基因,并进行表达和制备抗体,运用上述两种技术检测了这些基因在爪哇根结线虫不同发育时期的表达情况。结果表明:msp-3、msp-21、msp-28三个基因只在成虫中表达,msp-26和hsp-90两个基因在卵、二期幼虫和成虫中表达,msp-36只在二期幼虫中表达。另外经过Nucleotide BLAST分析,我们扩增的msp-36基因是一个新基因,在爪哇根结线虫从未报道过。